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Vídeo: Como você carrega uma amostra na cromatografia em coluna?
2024 Autor: Miles Stephen | [email protected]. Última modificação: 2023-12-15 23:39
Para carregar a coluna:
- Dissolva o amostra na quantidade mínima de solvente (5–10 gotas).
- Usando uma pipeta ou seringa com uma agulha grossa, pingue o amostra diretamente no topo da sílica.
- Uma vez que todo amostra foi adicionado, permita o coluna para drenar de forma que o nível do solvente toque o topo da sílica.
Em relação a isso, quanta sílica você usa em uma coluna?
Uma boa faixa é 100/20 a 100/10 (5 a 10 mL) de eluente para 100g sílica . Não é uma boa ideia usar um solvente diferente aqui - a separação ficará gravemente comprometida.
Em segundo lugar, como funciona a cromatografia em coluna flash? Cromatografia Flash . Camada fina cromatografia é usado para monitorar reações, verificar a pureza dos compostos e otimizar misturas de solventes para cromatografia em coluna . É uma microtécnica que requer quantidades muito pequenas de composto.
Portanto, por que é importante não deixar a fase estacionária secar ao operar uma coluna?
Em outras palavras, a pasta dentro do coluna nunca deveria ser permitido secar . Se isso acontecer, pode criar rachaduras e irregularidades no sólido Estágio , o que diminuirá a eficiência da separação. A amostra a ser separada é carregada em solução em um solvente adequado, de preferência o mais concentrado possível.
O que acontece se a coluna secar?
Se você deixa o coluna seca a sílica começará a rachar e você obterá uma separação pobre de seus compostos. Como você corre a coluna , nunca deixe o nível do solvente ficar abaixo do nível do gel de sílica ou você obterá resultados ruins.
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Como a sílica gel é preparada para cromatografia em coluna?
Preparação da coluna: Prepare a pasta de sílica gel com um solvente adequado e despeje suavemente na coluna. Abra a torneira de bloqueio e deixe um pouco de solvente escorrer. A camada de solvente deve sempre cobrir o adsorvente; caso contrário, rachaduras irão se desenvolver na coluna