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Como você carrega uma amostra na cromatografia em coluna?
Como você carrega uma amostra na cromatografia em coluna?

Vídeo: Como você carrega uma amostra na cromatografia em coluna?

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Vídeo: Cromatografia em coluna 2024, Novembro
Anonim

Para carregar a coluna:

  1. Dissolva o amostra na quantidade mínima de solvente (5–10 gotas).
  2. Usando uma pipeta ou seringa com uma agulha grossa, pingue o amostra diretamente no topo da sílica.
  3. Uma vez que todo amostra foi adicionado, permita o coluna para drenar de forma que o nível do solvente toque o topo da sílica.

Em relação a isso, quanta sílica você usa em uma coluna?

Uma boa faixa é 100/20 a 100/10 (5 a 10 mL) de eluente para 100g sílica . Não é uma boa ideia usar um solvente diferente aqui - a separação ficará gravemente comprometida.

Em segundo lugar, como funciona a cromatografia em coluna flash? Cromatografia Flash . Camada fina cromatografia é usado para monitorar reações, verificar a pureza dos compostos e otimizar misturas de solventes para cromatografia em coluna . É uma microtécnica que requer quantidades muito pequenas de composto.

Portanto, por que é importante não deixar a fase estacionária secar ao operar uma coluna?

Em outras palavras, a pasta dentro do coluna nunca deveria ser permitido secar . Se isso acontecer, pode criar rachaduras e irregularidades no sólido Estágio , o que diminuirá a eficiência da separação. A amostra a ser separada é carregada em solução em um solvente adequado, de preferência o mais concentrado possível.

O que acontece se a coluna secar?

Se você deixa o coluna seca a sílica começará a rachar e você obterá uma separação pobre de seus compostos. Como você corre a coluna , nunca deixe o nível do solvente ficar abaixo do nível do gel de sílica ou você obterá resultados ruins.

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