Qual é a função da sonda em um Southern blot?
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Vídeo: Qual é a função da sonda em um Southern blot?

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Vídeo: Princípio do Southern Blot - Aula de Biologia Molecular - UFCSPA 2024, Novembro
Anonim

A membrana é então tratada com um pequeno pedaço de DNA ou RNA chamado de sonda , que foi projetado para ter uma sequência que é complementar a uma sequência de DNA particular na amostra; isso permite o sonda para hibridizar, ou ligar, a um fragmento de DNA específico na membrana.

Além disso, qual é o propósito de um questionário sobre o Southern blot?

Usado para a identificação de sequências homólogas em um gel borrão entre o alvo de DNA / RNA e a "sonda" de DNA.

Da mesma forma, qual é o propósito da pré-hibridização? Pré-hibridização (Bloqueio) O DNA do esperma de salmão é comumente usado como um agente de bloqueio para evitar que a sonda grude na membrana, garantindo que ela interagirá apenas com as bandas de DNA desejadas que foram transferidas para a membrana.

Além disso, quais são as aplicações do Southern blotting?

Southern blotting é projetado para localizar uma sequência particular de DNA dentro de uma mistura complexa. Por exemplo, Southern Blotting poderia ser usado para localizar um determinado gene dentro de um genoma inteiro. A quantidade de DNA necessária para esta técnica depende do tamanho e da atividade específica da sonda.

Qual é a sequência correta de eventos no Southern blotting?

Existem quatro etapas principais na técnica de Southern blotting: Na primeira etapa, faça uma amostra DNA é quebrado ou digerido em pedaços menores usando uma enzima de restrição. Após a digestão, o DNA os fragmentos são separados por eletroforese em gel. O gel de agarose é geralmente usado para essa finalidade.

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