Vídeo: Quanto custa para transformar uma ligadura?
2024 Autor: Miles Stephen | [email protected]. Última modificação: 2023-12-15 23:39
Transformação . Adicione entre 1-5 µl de ligadura mistura para células competentes para transformação . Estendido ligadura com PEG causa uma queda na transformação eficiência (rápido Ligadura Kit). A eletroporação é recomendada para grandes construções (> 10.000 bp).
Portanto, quanto produto de ligação eu preciso para a transformação?
Transformação . Adicione entre 1-5 µl de ligadura mistura para células competentes para transformação . Estendido ligadura com PEG causa uma queda na transformação eficiência (rápido Ligadura Kit). A eletroporação é recomendada para grandes construções (> 10.000 bp).
Posteriormente, a questão é: o que é Ligadura e transformação? Em um experimento típico de clonagem, os pesquisadores primeiro inserem um pedaço de DNA, como um gene, em um pedaço circular de DNA chamado plasmídeo. Esta etapa usa enzimas de restrição e DNA ligase e é chamada de ligadura . Após um ligadura , a próxima etapa é transferir o DNA para as bactérias em um processo chamado transformação.
Posteriormente, também se pode perguntar: quanto DNA é necessário para uma ligação?
A concentração geral de vetor + inserção deve estar entre 1-10 Μg / ml para eficiência ligadura . Vetor: relações molares de inserção entre 1: 1 e 1:10 são recomendadas (1: 3 é o típico). Se você não tem certeza do seu DNA concentrações, realizar ligações múltiplas com proporções variáveis.
Por quanto tempo você pode armazenar uma reação de ligadura?
Ligações podem ser feito em temperatura ambiente ou mais frio (pense 12-16 ° C) durante a noite ou mesmo por alguns dias, se vocês está muito ocupado. Você pode tb armazenar uma ligadura na geladeira e retire depois para continuar ligando em temperatura ambiente por enquanto grande como necessário.
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